反相高效液相色谱的原理

根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱.流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱.非极性键合相色谱可作反相色谱.在现代液相色谱中应用最广泛,现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的.

高效液相色谱更适宜于分离.分析高沸点.热稳定性差.有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸.肽类.内酯.稠环芳烃.高聚物.药物.人体代谢产物.表面活性剂,抗氧化剂.杀虫剂.除莠剂的分析等物质的分析.

在反相色谱中,苯.萘.蒽的出峰顺序为:苯.萘.蒽. 根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱.流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱.由于流动相是极性溶剂,而苯.萘.蒽为非极性物质,极性顺序从大到小是苯.萘.蒽,因此出峰顺序应该是苯.萘.蒽.

1.气相色谱仪原理:利用色谱柱先将混合物分离,然后利用检测器依次检测已分离出来的组分. 应用范围: 环境保护: 大气水源等污染地的痕量毒物分析.监测和研究. 生物化学: 临床应用,病理和毒理研究. 食品发酵: 微生物饮料中微量组分的分析研究. 中西药物: 原料中间体及成品分析. 2.液相色谱仪的原理:利用混合物在液.固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器. 由于具有高分辨率.高灵敏度.速度快.色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学.

荷兰学者范第姆特等人吸收塔板理论中的一些概念,并进一步把色谱分配过程与分子扩散和气液两相中的传质过程联系起来,建立了色谱过程的动力学理论,即速率理论.速率理论认为,单个组分分子在色谱柱内固定相和流动相间要发生千万次转移,加上分子扩散和运动途径等因素,它在柱内的运动是高度不规则的,是随机的,在柱中随流动相前进的速率是不均一的.与偶然误差造成的无限多次测定的结果呈正态分布相类似,无限多个随机运动的组分粒子流经色谱柱所用的时间也是正态分布的.

平衡色谱柱也就是把色谱柱老化一下,为的是把色谱柱中易挥发的物质冲洗出来,减少柱流失带来的干扰.对于已经用过的色谱柱,同时也会把残留在柱子里的样品冲洗出来.一般说法是老化,或者冲柱子.

高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送.色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱,同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测. 高效液相色谱按其固定相的性质可分为高效凝胶色谱.疏水性高效液相色谱.反相高效液相色谱.高效离子交换液相色谱.高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型.用不同类型的高效液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似.其不同之处是高效液相色谱灵敏.快速.

HPLC流动相,反相高效液相色谱,狭义上指的是固定相颗粒表面为非极性材料(如含C18链),流动相为极性的一种高效液相色谱.广义上只要流动相的极性大于固定相极性的高效液相色谱,都可以叫做反相液相色谱.通过这类反相层析柱的分子按其极性大小移动,极性越大移动越快.

离子色谱瓶子可以用酒精洗,离子色谱(IonChromatography)是高效液相色谱(HPLC)的一种,是分析阴离子和阳离子的一种液相色谱方法. 狭义而言,离子色谱法是以低交换容量的离子交换树脂为固定相对离子性物质进行分离,用电导检测器连续检测流出物电导变化的一种色谱方法.<离子色谱原理与应用>中对离子色谱法的定义是:利用被测物质的离子性进行分离和检测的液相色谱法.