TI质粒可以作为载体的条件

质粒是小型环状DNA分子,在基因工程中作为最常用,最简单的载体. 质粒作为载体的条件有: 1.具有复制起始点. 2.具有两种以上易被检测的选择性标记. 3.在选择标记上具有多种限制酶的单一切点. 4.具有尽可能小的相对分子质量. 5.应属于松弛复制型. 6.应为非传递性质粒理想值粒载体例子.

Ti质粒是在根瘤土壤杆菌细胞中存在的一种染色体外自主复制的环形双链DNA分子.它可以控制根瘤的形成,可作为基因工程的载体.Ti是英文肿瘤诱发(tumor-inducing)的缩略式. DNA也叫脱氧核糖核酸,是分子结构复杂的有机化合物.作为染色体的一个成分而存在于细胞核内.功能为储藏遗传信息.DNA分子巨大,由核苷酸组成.

基因工程载体: 在基因工程重组DNA技术中将DNA片段(目的基因)转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子.三种常用的载体是质粒.λ噬菌体的衍生物和动植物病毒,最常用的是质粒. 在基因操作过程中使用运载体有两个用途:一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去. 二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制. 基因工程中载体需要满足的条件: 有一个或多个限制酶的切点,便于目的基因插入. 有自我复制能力或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA复制的能力. 必须带有标记基因,以便筛选. 对

限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓CATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-.在质粒上有限制酶I的一个切点,在目的基因的两侧各有1个限制酶Ⅱ的切点. 载体,指在基因工程重组DNA技术中将DNA片段转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子.三种最常用的载体是细菌质粒.噬菌体和动植物病毒.在实际生活中,胰岛素就可以通过使用载体将已插入胰岛素基因片段的质粒放入大肠杆菌内.经过插入基因片段的质粒就称作载体.该质粒在细菌内可以进行自我复制,并且不会影响到生物原来的活动.

载体是指在基因工程重组DNA技术中将DNA的片段(目的基因)转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子.三种最常用的载体是细菌质粒.噬菌体和动植物病毒. 在实际生活中,胰岛素就可以通过使用载体将已插入胰岛素基因片段的质粒放入大肠杆菌内.经过插入基因片段的质粒就称作载体.该质粒在细菌内可以进行自我复制,并且不会影响到生物原来的活动.

农杆菌转化法适用于双子叶植物和裸子植物. 农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌,它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物和裸子植物的受伤部位(受伤处的细胞会分泌大量酚类化合物,从而使农杆菌移向这些细胞),并诱导产生冠瘿瘤或发状根. 目的基因插入Ti质粒的T-DNA上--进入农杆菌--导入植物细胞--目的基因整合到植物染色体的DNA上--目的基因得以稳定维持和表达.

理论上说,只要是双子叶和裸子植物都可被感染.当植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物吸引农杆菌移向这些细胞,农杆菌的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞的DNA上.根据这点将目的基因插入T-DNA通过农杆菌转化,使目的基因进入植物细胞,并将其插入到植物细胞中的染色体DNA上.农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物,而对大多数单子叶植物没有感染能力.当植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物,吸引农杆菌移向这些细胞,

载体除了质粒还有动植物病毒.λ噬菌体的衍生物..腺病毒载体.逆转录病毒载体等. 而这些载体的获取方法主要有人工合成法.从基因文库获取.PCR技术扩增等. 另外,载体指的是某些能传递能量或运载其他物质的物质,载体一般是经过改造的质粒,还可以是动植物病毒的DNA,其只作为两个物质之间沟通的桥梁.

酵母菌中含有质粒,质粒广泛存在于生物界,从细菌.放线菌.丝状真菌.大型真菌.酵母到植物,甚至人类机体中都含有.从分子组成看,质粒包含DNA质粒,也包含RNA质粒:从分子构型看,有线型质粒.也有环状质粒,其表型也多种多样.细菌质粒是基因工程中最常用的载体. 质粒是细菌.酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子,存在于细胞质中,具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息,是闭合环状的双链DNA分子.质粒不是细菌生长繁殖所必需的物质,可自行丢失或人工处理而消除,